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締一生物生物科普:關于胎牛血清知識問答(三)

更新時間:2017-12-25  |  點擊率:2001

胎牛血清是指懷孕5-8個月的母牛被屠宰后,發(fā)育未*的胎牛心臟穿刺采血后,通過一系列工藝處理zui終獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育*這些因子自動消失。那么,面對如此珍貴的胎牛血清,實驗人該如何防治黑點生成、如何儲存使用血清呢?

1、 細胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成?  

答:(1) 盡可能地減少血清凍融次數。 

(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。  

(3) 培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2。  

(4) 嚴格控制配制培養(yǎng)基的水質,容器定期刷洗。  

(5) 掌握細胞傳代的*時機,細胞切勿生長過老。 

2、如何儲存使用血清?

答:儲存條件:血清一般儲存于-20℃,同時應避免反復凍融。購買大包裝的血清后,需要分裝成小包裝,儲存于-20℃,使用前融化。關于血清融化,我們推薦以三步來進行(詳細可參閱《關于胎牛血清知識問答(一)》)。例如,500ml的胎牛血清,首先在室溫條件下放置90min,然后再20℃水浴放置25min,zui后在37℃水浴放置35分鐘即可。

使用濃度:自從有了合成培養(yǎng)基,血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5-20%,zui常用是10%。過多血清容易使培養(yǎng)中的細胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無限細胞系,迅速生長之后容易發(fā)生惡性轉化。 

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